Biomarcadores en el fluido gingival crevicular: Revisión de literatura

os biomarcadores son moléculas que pueden ser medidas objetivamente y evaluadas como indicadores de procesos biológicos normales, procesos patológicos o respuestas farmacológicas a la intervención terapéutica. En el fluido gingival crevicular se han estudiado biomarcadores como proteínas del huésped que incluyen enzimas, inmunoglobulinas, interleuquinas, citoquinas, quimioquinas y prostaglandinas, que podrían ser de ayuda para evaluar el diagnóstico periodontal y los resultados del tratamiento, además de monitorear pacientes en riesgo de desarrollar periodontitis. El propósito de esta revisión es mostrar algunos de los biomarcadores más estudiados en la enfermedad periodontal.

iomarkers are molecules that can be objectively measured and evaluated as indicators of normal biological processes, pathological processes or pharmacological responses to therapeutic intervention. In the crevicular gingival fluid, biomarkers have been studied as host proteins including enzymes, immunoglobulins, interleukins, cytokines, chemokines and prostaglandins, which could be helpful in evaluating periodontal diagnosis and treatment outcomes, as well as monitoring patients at risk of develop periodontitis. The purpose of this review is to show some of the most studied biomarkers in periodontal disease.

Lesiones cervicales no cariosas / Non-carious cervical lesions

El objetivo de este trabajo consiste en describir las distintas lesiones cervicales no cariosas, la abrasión, la erosión y la abfracción. Se desarrollarán en detalle su etiología, localización y características clínicas. Se mencionarán los diferentes procedimientos a realizar para su prevención y los materiales a utilizar para su restauración.

This article describes the different types of non-cariouscervical lesions, for example abrasion, erosionand abfraction. We will discuss their etiology, location and clinical features in detail. We will describe the procedures to prevent them, aswell as the materials used for their restoration.

Efecto del tratamiento periodontal no quirúrgico sobre los niveles de Piridinolina (ICTP) en el fluido gingival crevicular (FGC)

a enfermedad periodontal destructiva afecta los tejidos de soporte del diente, teniendo como consecuencia final la pérdida del mismo; por lo cual la investigación se dirige hacia medidas objetivas de identificación de riesgo como lo son los biomarcadores de destrucción. Debido a que los estudios realizados con biomarcadores presentes en el fluido gingival crevicular (FGC) han reportado resultados promisorios, es factible asociar marcadores de degradación tisular con la progresión de la enfermedad periodontal. El objetivo del presente estudio es determinar el efecto del tratamiento periodontal no quirúrgico, sobre los niveles de ICTP en el FGC de pacientes con periodontitis crónica. Materiales y métodos: En muestras de FGC (pre y postratamiento), tanto de sitios activos como de inactivos determinados según el método de tolerancia, se midieron los niveles de ICTP utilizando el ICTP EIA. Uni Q, los resultados se analizaron usando el programa Stata 7.0 y el student-test para las muestras no paramétricas. Resultados: Los niveles de ICTP disminuyeron significativamente después de realizar el tratamiento periodontal no quirúrgico (p= 0,0001). Conclusiones: De acuerdo con los resultados obtenidos, la ICTP puede ser un buen marcador para monitorear los efectos del tratamiento periodontal no quirúrgico.

he destructive periodontal disease affects the tissues supporting the teeth, with the final result in the loss of it; so the research is directed towards identifying objective measures of risk such as biomarkers of destruction. Because studies of biomarkers present in the gingival crevicular fluid (FGC) have reported promising results, it is posible associated markers of tissue degradation with the progression of periodontal disease. The aim of this study is to determine the effect of nonsurgical periodontal treatment on the levels of pyridinoline in the FGC patients with chronic periodontitis. Materials and Methods: FGC samples (before and after treatment), both active and inactive sites determined by the method of tolerance, ICTP levels were measured using the ICTP EIA. Uni Q, the results were analyzed using Stata 7.0 program and the student-test for nonparametric samples Results: ICTP levels decreased significantly after performing non-surgical periodontal treatment (p = 0.0001). Conclusions: According to the results, the ICTP may be a good marker to monitor the effects of nonsurgical periodontal treatment.

Cytokine and metalloproteinases in gingival fluid from patients with chronic periodontitis / Niveles de citocinas y metaloproteinasas en fluido gingival de pacientes con periodontitis crónica

The purpose of the present research was to determine the levels of IL-1α, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-6sR, IL-8, IL-10, MMP-3 and MMP-8 in gingival crevicular fluid (GCF) of subjects with chronic periodontitis. Clinical measurements were carried out in 20 patients with chronic periodontitis and 11 periodontally healthy controls. The clinical indexes evaluated were: gingival index (GI), plaque index (PI), bleeding on probing (BOP), probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL); the measurements were taken at six sites per tooth in all teeth in each subject. GCF samples were taken from one tooth per quadrant, and the levels of mediators were measured using an ELISA test. Statistically significant differences were observed between patients and control group in relation to all clinical parameters evaluated (p<0.05). The gingival concentrations, in pg/mL, of IL-1α (patients: 239.06 ± 65.5 vs control: 97.79 ± 15.81), IL-1β (patients: 157.19 ± 36.4 vs control: 63.44 ± 19.04), TNF-α (patients: 10.87 ± 1.7 vs control: 1.15 ± 0.84), IL-6 (patients: 3.77 ±1.7 vs control: 0.43 ± 0.22), IL-6Sr (patients: 655.59 ± 185.8 vs control: 73.59 ± 23.18), IL-8 (patients: 496.3 ± 155.3 vs control: 206.13 ± 46.63), IL-10 (patients: 10.75 ± 3.6 vs control: 2.41 ± 0.57), MMP-3 (patients: 3531 ± 1558.2 vs control: 724.84 ± 289.51) and MMP-8 (patients: 8231.70± 1279.2 vs control: 1534.67± 814.90) were significantly greater in patients with periodontal disease than in the control group (p<0.001). The higher levels of the cytokines and metalloproteinases obtained in this study were significantly associated with the severity of the periodontal disease.

El propósito de la presente investigación fue determinar los niveles de IL-1α, IL-1β, TNF-α, IL-6, IL-6sR, IL-8, IL-10, MMP-3 and MMP-8 en fluido gingival crevicular (FGC) de sujetos con periodontitis crónica. Se evaluaron los parámetros clínicos en 20 pacientes con periodontitis crónica y 11 controles periodontalmente sanos. Los índices clínicos evaluados fueron: indice gingival (IG), indice de placa dental (IP), sangramiento al sondaje (SS), profundidad del saco (PS) y nivel de inserción (NI). Las muestras de FGC fueron tomadas de un diente por cada cuadrante y los niveles de los mediadores fueron medidos utilizando la prueba de ELISA. Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre los pacientes y el grupo control en relación a todos los parámetros clínicos evaluados (p<0,05). Las concentraciones en fluido gingival en pg/mL de IL-1α(pacientes: 239,06 ± 65,5 vs control: 97,79 ± 15,81), IL-1β (pacientes: 157,19 ± 36,4 vs control: 63,44 ± 19,04), TNF-α (pacientes: 10,87 ± 1,7 vs control: 1,15 ± 0,84), IL-6 (pacientes: 3,77 ±1,7 vs control: 0,43 ± 0,22), IL-6Sr (pacientes: 655,59 ± 185,8 vs control: 73,59 ± 23,18), IL-8 (pacientes: 496,3 ± 155,3 vs control: 206,13 ± 46,63), IL-10 (pacientes: 10,75 ± 3.6 vs control: 2,41 ± 0,57), MMP-3 (pacientes: 3531 ± 1558,2 vs control: 724,84 ± 289,51) and MMP-8 (pacientes: 8231,70± 1279,2 vs control: 1534,67± 814,90), estuvieron significativamente mayores en pacientes con enfermedad periodontal que en el grupo control. (p<0,001). Los niveles elevados de citocinas y metaloproteinasas obtenidos en este estudio estuvieron significativamente asociados con la severidad de la enfermedad periodontal.

Niveles de MMP-3 y MMP-8 en pacientes con periodontitis crónica antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico / MMP-3 and MMP-8 levels in patients with chronic periodontitis before and after nonsurgical periodontal therapy

En la periodontitis crónica (PC) se desencadenan procesos inmunoinflamatorios, donde se liberan metaloproteinasas de la matriz (MMPs), enzimas involucradas en la degradación de la matriz extracelular, las cuales pueden ser detectadas en el fluido gingival crevicular (FGC). El propósito del estudio fue determinar los niveles de MMP-3 y MMP-8 en FGC, antes y después del tratamiento periodontal no quirúrgico (TPNQ) para evaluar actividad de la enfermedad y respuesta terapéutica. Once pacientes con periodontitis crónica y 11 controles sanos fueron seleccionados. Se evaluaron los parámetros clínicos: índice gingival, índice de placa, profundidad al sondaje y pérdida de inserción; en todos los dientes de cada individuo y en seis sitios por diente. Muestras de FGC fueron tomadas de un diente por cuadrante, con profundidad de saco ≥ 4mm y pérdida de inserción ≥ 5 mm, los niveles de MMP-3 y MMP-8 fueron determinados por ELISA. Diferencias estadísticamente significativas fueron observadas entre los parámetros clínicos del grupo control y los pacientes con PC antes del tratamiento, registrándose posterior al TPNQ disminución significativa de todos los índices. Las concentraciones iniciales de MMP-3 y 8 en el grupo con PC fueron significativamente mayores a las obtenidas luego del TPNQ y en el grupo control, sin observar correlación entre parámetros clínicos y niveles de MMPs. La disminución significativa de los valores de MMP-3 y 8 en FGC de los pacientes con PC, posterior al TPNQ, indican la participación importante de estas enzimas en la degradación del tejido, y la efectividad del tratamiento periodontal para su control.

Immune-inflammatory processes are trigged in chronic periodontitis (CP), where matrix metalloproteinases (MMPs) are released and involved in the degradation of the extracellular matrix components that can be detected in the gingival crevicular fluid (GCF). The purpose of the study was to determine the levels of MMP-3 and MMP-8 in GCF, before and after nonsurgical periodontal treatment (NSPT), to evaluate disease activity and therapy response. Eleven patients with PC and eleven healthy controls were selected. Clinical measurements to evaluate gingival index (GI), plaque index (PI), probing depth (PD) and clinical attachment loss (CAL) were made in all the teeth of each individual and in six sites per tooth. GCF samples were taken from one tooth per quadrant, with a pocket depth ≥ 4 mm and a clinical attachment loss ≥ 5 mm, and the levels of MMP-3 and MMP-8 measured using an ELISA test. Statistically significant differences in clinical parameters were observed (p < 0.05) between patients with CP and control groups before the periodontal treatment, with significant decrease in all indexes after the NSPT. The initial concentrations of MMP-3 and MMP-8 were significantly higher than those obtained after the NSPT and in the control group, without observing a correlation between the clinical parameters and the levels of MMPs. Increased levels of MMP-3 and MMP-8 in the GCF of patients with PC declined significantly after NSPT, and the difference between the levels in healthy individuals and patients, suggests the important participation of these MMPs in tissue destruction in PC disease.

Detección de Virus Papiloma Humano en el fluido gingival de pacientes con inmunodeficiencia humana y enfermedad periodontal / Detection of Human Papillomavirus in gingival fluid of Venezuelan HIV patients with periodontal disease

Evidencias sugieren que los virus pueden participar en la activación de la enfermedad periodontal, permitiendo el sobrecrecimiento de bacterias periodontopatógenas. El objetivo del estudio fué la detección molecular de VPH en fluido gingival (FG) de pacientes VIH+ con enfermedad periodontal. Se evaluaron muestras de FG de 20 pacientes VIH+ con enfermedad periodontal que asistieron al Centro de Atención de Pacientes con Enfermedades Infecciosas (CAPEI) de la Facultad de Odontología de la Universidad Central de Venezuela, 13 bajo terapia antirretroviral (HAART) y 7 VIH+ sin HAART. Se incluyeron 7 pacientes seronegativos con periodontitis crónica y como grupo control 7 pacientes seronegativos periodontalmente sanos. Se extrajo el ADN, se amplificó la región L1 de VPH con primers MY09 y MY11. Las muestras VPH+ fueron genotipificadas para los tipos 6, 11, 16, 18, 31 y 45. VPH fue detectado en 46% de los pacientes VIH+ bajo terapia. El contaje CD4+ en la población VPH+ no presentó diferencias con el grupo VPH-, y la carga viral mostró valores promedio significativamente mayores (200.470± 324.244 copias/mL) con respecto a los pacientes VPH- (10.246±23.805 copias/mL). Las muestras VPH+ presentaron los genotipos 6 y 11, de los cuales 66,6% estaban coinfectados con ambos tipos. Las condiciones periodontales no presentaron diferencias entre los individuos con doble infección viral por VPH y VIH, y los que solo portaban VIH. VPH fue detectado solamente en fluido gingival de pacientes VIH+ con HAART, indicando que esta terapia puede influir en el estado inmunológico independientemente de las condiciones periodontales.

Evidence suggests that viruses may be involved in the activation of periodontal disease, allowing the overgrowth of periodontal pathogens. The purpose of the present study was to detect the presence of Human Papillomavirus (HPV) in gingival crevicular fluid (GCF) in HIV+ Venezuelan patients with periodontal disease. We evaluated GCF samples from 20 HIV+ patients with periodontal disease from the Infectious Disease Center, Faculty of Dentistry, Central University of Venezuela, and were clinically examined to establish their periodontal conditions, 13 under HAART (antiretroviral therapy) and 7 without HAART. Seven seronegative patients with chronic periodontitis and 7 seronegative patients, without periodontal disease were included. DNA extraction was performed, the consensus primers MY09 and MY11 for the HPV L1 region were used for PCR amplification. Genotipification was made for the 6, 11, 16, 18, 31 and 45 genotypes. HPV were detected in 46% of HIV+ patients under therapy. The CD4 cell counts in the HPV+ patients were not significantly different from the HPV-group. The viral load in the HPV+ group was significantly higher (200,470 ± 324,244 copy/mL) than in the HPV- patients (10,246 ± 23,805 copy/mL). Genotypes 6 and 11 were observed in the HPV positive samples, of which 4/6 (66.6%) presented coinfection with both types. No significant differences in the periodontal conditions were observed between patients with HPV-HIV infection related to patients with only HIV. HPV was detected only in the gingival crevicular fluid of HIV+ patients under HAART independently of the periodontal conditions.

Efecto antiinflamatorio de apitoxina de Apis mellifera sobre prostaglandina E2 del fluido crevicular gingival de pacientes con y sin enfermedad periodontal, sometidos a apiterapia: ensayo preliminar / Anti-inflammatory effect of apitoxin and Apis mellifera on prostaglandin E2 in gingival crevicular fluid of patients with and without periodontal disease, submitted to apitherapy: preliminary test

Introducción: La apitoxina que es producida por la Apis mellifera posee efecto antiinflamatorio sobre una serie de marcadores biológicos. La prostaglandina E2 forma parte de ellos, estando presente en el fluido gingival crevicular (FGC). La prostaglandina E2 es evidenciada en la enfermedad periodontal. Objetivo: En este estudio se evaluó el efecto antiinflamatorio de la apitoxina sobre la concentración de prostaglandina E2 del FGC de un paciente sin enfermedad periodontal (SEP) y otro con enfermedad periodontal (CEP). Materiales y Método: Se seleccionó un paciente SEP y otro CEP, que sometidos a apiterapia durante 28 días, se registraron 5 muestras por paciente de FGC, siendo almacenadas, centrifugadas y refrigeradas para su conservación. Posteriormente se midió la concentración de prostaglandina E2 crevicular mediante inmunodifusión radial simple en placas petri con concentración de anticuerpo anti prostaglandina E2 de 1:1000. Selladas a 4°C, se esperó 72 horas para permitir su difusión, tiñéndose con Azul brillante de Coomasie, determinándose la concentración de cada placa. Resultados: Paciente SEP inmediatamente antes de apiterapia presentó una concentración de 0.9636 ± 0.0055 (ug/uL), finalizando con una concentración de 0.9196+/-0.0733 (ug/uL) al completar 28 días de tratamiento. El paciente CEP antes de recibir apiterapia presento una concentración de 1.1866 +/- 0.0867 (ug/uL), finalizando con una concentración de 0.9858 +/- 0.0074 (ug/uL) al completar 28 días de tratamiento. Discusión: Los hallazgos de este estudio demuestran una disminución de la concentración de PGE2 del FGC tanto para el paciente CEP y SEP sometidos a apiterapia durante 28 días, siendo esta disminución 3.7 veces mayor en el paciente CEP.

Introduction: Apitoxin, which is produced by Apis mellifera, has anti-inflammatory effect on a number of biomarkers. Prostaglandin E2 is one of them, being present in gingival crevicular fluid (GCF). Prostaglandin E2 is evidenced in periodontal disease. Objective: This study evaluated the antiinflammatory effect of apitoxin on concentration of prostaglandin E2 FGC in a patient with no periodontal disease (SEP) and other with periodontal disease (CEP). Materials and Methods: We selected both a SEP and CEP patient who were subjected to apitherapy for 28 days. There were 5 samples per patient of FGC, being stored, centrifuged and refrigerated for their preservation. Subsequently, the concentrations of crevicular prostaglandin E2 were measured by simple radial immunodiffusion in petri dishes with antibody concentration of prostaglandin E2 of 1:1000. Sealed at 4 °C, after 72 hours to allow diffusion, they were stained with Coomassie Brilliant Blue, determining the concentration of each plate. Results: SEP patient immediately before apitherapy presented a concentration of 0.9636 +/- 0.0055 (g / mL), ending with a concentration of 0.9196 +/- 0.0733 (g / mL) upon completion of 28 days of treatment. CEP patient before receiving apitherapy showed a concentration of 1.1866 +/- 0.0867 (g/mL), ending with a concentration of 0.9858 +/- 0.0074 (g/mL) upon completion of 28 days of treatment. Discussion: The findings of this study show a decrease in the concentration of PGE2 of FGC both for the CEP and SEP patient subjected to apitherapy for 28 days, being this decrease 3.7 times higher in the CEP patient.